miRNA定量預(yù)試劑

miRNA Universal SYBR^® qPCR Master Mix

miRNA染料法定量預(yù)混液

超高的擴(kuò)增特異性：基于化學(xué)法熱啟動(dòng)的AceTaq^® DNA Polymerase，95°C前*封閉酶活，配以特異性促進(jìn)因子Exactor，擴(kuò)增更特異。

*的反應(yīng)體系：適的Buffer 組分及濃度，更適用于microRNA的逆轉(zhuǎn)錄及qPCR 實(shí)驗(yàn)。

寬廣的平臺(tái)兼容：miRNA Universal SYBR^® qPCR Master Mix中添加通用型ROX使得mix能夠在兼容不同平臺(tái)qPCR儀器，而無需進(jìn)行ROX濃度調(diào)整。

圖1. 超高的擴(kuò)增特異性

microRNA 序列短，同一家族不同成員序列極其相似，有些僅有單個(gè)堿基差別，因此特異性對(duì) microRNA 定量至關(guān)重要。miRNA Universal SYBR ^® qPCR Master Mix 以化學(xué)法熱啟動(dòng) AceTaq ^® DNA Polymerase 為核心酶，配以優(yōu)化的Buffer，能夠大限度區(qū)分 microRNA 同一家族不同成員間單個(gè)堿基的差異，實(shí)現(xiàn)高特異性定量。

圖2. 的擴(kuò)增靈敏度

以 HeLa 細(xì) 胞 Total RNA 為 模 板 逆 轉(zhuǎn) 錄， 擴(kuò) 增 hsa-miR-15、hsa-miR-29、hsa-miR-155、hsa-miR-200 基 因； 以 小 鼠 肝 臟組織 Total RNA 樣本進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，擴(kuò)增 mmu-miR-16、mmu-miR-20、mmu-miR-21 基因。結(jié)果顯示，與同類產(chǎn)品相比，miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop) (Vazyme #MR101) 配 套 miRNA Universal SYBR ^®qPCR Master Mix (Vazyme #MQ101) 的反應(yīng)體系，均有優(yōu)異的表現(xiàn)。

圖3. 寬廣的平臺(tái)兼容性

使用miRNA Universal SYBR ^® qPCR Master Mix(Vazyme #MQ101) 在不同qPCR 儀上擴(kuò)增同一基因，在StepOnePlus^TM、QuantStudio TM 3、CFX Connect 均具有很好的定量結(jié)果，說明Vazyme #MQ101 儀器適用性廣，無需針對(duì)不同儀器調(diào)整 ROX 濃度。

本產(chǎn)品是使用SYBR^® Green I嵌合熒光法進(jìn)行miRNA定量反應(yīng)的預(yù)混液。由于miRNA序列短，且同一家族的miRNA序列往往高度相近，故在定量時(shí)對(duì)特異性要求*。本品基于化學(xué)法熱啟動(dòng)的AceTaq^® DNA Polymerase，配以優(yōu)化的Buffer，能夠極大地減少非特異性擴(kuò)增；同時(shí)，特殊的ROX Reference Dye，使得預(yù)混液適應(yīng)于所有qPCR儀器，無需在不同的儀器上調(diào)整ROX濃度，只需在配制反應(yīng)體系時(shí)加入引物和模板即可進(jìn)行擴(kuò)增。

a.包含dNTP，Mg²⁺，AceTaq DNA Polymerase，SYBR Green I，Specific ROX Reference Dye等。

b.序列為AGTGCAGGGTCCGAGGTATT

- 20℃避光保存

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